1. PCR実験でDNA断片の増幅物がバンドとして現れてこない場合、一般に、次のような理由が

　　考えられる。今回の実験結果を考えるヒントにせよ。

　　　　・ 鋳型となるＤＮＡに、プライマーとの相同配列がなかった。

　　　　・ 鋳型となるＤＮＡの量が不充分だった。

　　　　・ 反応液の成分に問題があった。

　　　　　　　　　　　＝（プライマー、バッファ、酵素、等が本来の働きをしなかった）　

　　　　・ 反応液のなかに、反応を阻害する物質が持ち込まれた。

　　　　・ 反応の温度や時間、サイクル数などの設定が適切でなかった。

2. PCR実験では、理想的には、n回の反応サイクルで、DNA断片は2のn乗倍に増加する。

　 つまり、20回の反応サイクルで、DNA量は100万倍になる。PCR実験は非常に検出感度が高い.

3. 3.PCRではDNAの検出感度が非常に高いため、ほんの微量のサンプルの混入によっても、 バンド
   

   が現れることがある。

4. 4.PCR実験では,理論的には複数のDNA断片が増幅される場合でも、一部のDNA断片しか検出されないことがある。（個々のDNA断片の増幅効率は、実際には、断片の長さや塩基配列などの影響を受ける。このため、増えやすいバンドと増えにくいバンドが混じっていると、例えば30サイクルのあとでは、両者の量比には、とんでもない差がついてしまう）。　　

レポート作成のヒント

ハネモからのDNA抽出について

1. アガロースゲル電気泳動像のうえで、マーカーＤＮＡのEtBr発色量と比較し、ハネモから

　　抽出したDNAのおおよその回収量を推定する。

2. 抽出した核酸の吸収スペクトル、吸光度と、ゲル電気泳動像を比較すると、何がわかるか？

PCR実験に関する補足説明

ハネモとウミウシのPCR結果の比較について

1.　テンプレート（=鋳型DNA)とプライマーの組み合わせの意味をよく考えよ。

2．ポジティブコントロール（ポジティブ対照処理区）、ネガティブコントロール（ネガティブ対

　　照処理区）の意味をよく考えよ。

3.　その他、配布した「実験のテキスト」に記した考察の方法やヒントなどを参考にせよ。